近年來(lái)，國(guó)產(chǎn)的elisa試劑盒在實(shí)驗(yàn)室中也開始逐漸普及，而絕大多數(shù)是用來(lái)檢測(cè)未知樣本中抗原的濃度。選擇我公司的試劑盒產(chǎn)品可提供技術(shù)指導(dǎo)及零費(fèi)用ELISA試劑盒代測(cè)服務(wù)，相對(duì)來(lái)說(shuō)，比自己慢慢摸索條件快得多，不僅可以讓實(shí)驗(yàn)更便利，還能夠更加精確。 在ELISA實(shí)驗(yàn)中常會(huì)遇到這些問(wèn)題：
1. 溫育條件不一致，上海恒遠(yuǎn)建議：恒溫箱溫育較水浴顯色深，OD值高出0.1-0.15，均采用恒溫箱。如用水浴水溫應(yīng)控制在37℃。
2. 樣品數(shù)量不一，加樣時(shí)間長(zhǎng)短不一。當(dāng)重復(fù)某一樣品時(shí)，加樣時(shí)間盡可能與次接近。
考慮到有些客戶沒(méi)有實(shí)驗(yàn)設(shè)備，我公司還可以提供代測(cè)服務(wù)，只需付試劑盒的費(fèi)用，代測(cè)是免費(fèi)的哦！代測(cè)方法主要采用這五大方法：
一、直接法
將抗原直接固定在固相載體上，參加酶符號(hào)的一級(jí)抗體，即可測(cè)定抗原總量，此一級(jí)抗體的特異性非常重要。 1. 優(yōu)勢(shì)：操作手續(xù)簡(jiǎn)略，因無(wú)須運(yùn)用二抗可防止交互反響。
2. 缺陷：實(shí)驗(yàn)中的一抗都得用酶符號(hào)，但不是每種抗體都適合做符號(hào)，費(fèi)用相對(duì)進(jìn)步。
二、間接法
此測(cè)定辦法與直接法相似，不一樣在于一級(jí)抗體沒(méi)有酶符號(hào)，改用酶符號(hào)的二級(jí)抗體去辨識(shí)一級(jí)抗體來(lái)測(cè)定抗原量。
1. 優(yōu)勢(shì)：二抗能夠加強(qiáng)信號(hào)，并且有多種挑選能做不一樣的測(cè)定剖析。不加酶符號(hào)的一級(jí)抗體則能保存它*多的免疫反響性。
2. 缺陷：交互反響發(fā)作的機(jī)率較高。
三、雙抗體夾心法
被檢測(cè)的抗原包被在兩個(gè)抗體之間，其間一個(gè)抗體將抗原固定于固相載體上，即捕捉抗體。另一個(gè)則是檢測(cè)抗體，此抗體可用酶符號(hào)后直接測(cè)定抗原的量；或不符號(hào)，再透過(guò)酶符號(hào)的二級(jí)抗體來(lái)測(cè)定抗原的量。這兩種抗體有必要當(dāng)心選擇，才可防止交互反響或競(jìng)爭(zhēng)一樣的抗原聯(lián)系部位。
1. 優(yōu)勢(shì)：高活絡(luò)、高專一性，抗原無(wú)須事前純化。
2. 缺陷：抗原必定得具有兩個(gè)以上的抗體聯(lián)系部位。
四、競(jìng)爭(zhēng)法
樣本里的抗原（自在抗原）和純化并固定在固相載體上的抗原（固定抗原）一同競(jìng)爭(zhēng)一樣的抗體，當(dāng)樣品里的自在抗原越多，就能夠聯(lián)系越多的抗體，而固定抗原就只能聯(lián)系到較少的抗體，反之亦然。經(jīng)清潔過(guò)程，洗去自在抗原和抗體的復(fù)合物，只留下固定抗原和抗體的復(fù)合物，拿來(lái)與只要固定抗原的對(duì)照組成果相比擬，依據(jù)呈色區(qū)別就可計(jì)算出樣品里的抗原含量。
1. 優(yōu)勢(shì)：可適用比擬不純的樣本，并且數(shù)據(jù)再現(xiàn)性很高。
2. 缺陷：全體的敏感性和專一性都較差。
五、根據(jù)細(xì)胞法（*新ELISA技術(shù)）
是一種新的定性蛋白檢測(cè)技術(shù)，將細(xì)胞直接在微孔板里培育，待檢測(cè)時(shí)，不需抽提蛋白和裂解細(xì)胞，便可直接丈量微孔板里蛋白經(jīng)影響或抑制作用后的改變。
1. 優(yōu)勢(shì)：無(wú)需裂解細(xì)胞，所以方針蛋白丟失*少，可測(cè)定完好細(xì)胞、黏附細(xì)胞、還有非粘附細(xì)胞。
2. 缺陷：不能測(cè)定抗原量。
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