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上海恒遠為您分享：除去雜抗體的兩種方法

點擊次數(shù)：13537 發(fā)布時間：2017/10/19 9:55:27

抗體的種類很多，當(dāng)研究某一種或某幾種抗體時，血液或淋巴液中的其他抗體都是雜抗體，很多時候要去除。今天上海恒遠為大家分享：除去雜抗體的兩種方法

1.親和層析法

將交叉雜抗原交聯(lián)到瓊脂糖珠4B上醫(yī)學(xué)教育網(wǎng)|搜集整理，如除去抗白蛋白抗體，則交聯(lián)上白蛋白或不含甲胎蛋白的血清，裝柱后，將預(yù)吸收的抗體通過親和層析柱，雜抗體吸附在柱上，流出液則是單價特異性抗體。

2.吸附劑方法

用不含特異性抗原的抗原液，即不含用于免疫動物抗原的其他雜抗原液，如血清、組織液或已知的某種雜抗原，用雙功能試劑將其交聯(lián)，做成固相吸附劑。如用不含甲胎蛋白的血清，稀釋1倍后，加入0.25%的戊二醛或丙酮醛，放冰箱一夜后，該血清成為膠凍狀，用力打碎（或用組織粉碎器），用緩沖液多次洗滌后，則成為顆粒狀的凝膠吸附劑。用這種吸附劑直接加到抗血清中（約1/10），抗原則與雜抗體結(jié)合，上清液則為無雜抗體的單價特異性抗體。有時因雜抗體太多，必須處理吸收兩次才能完全去除。吸附過的凝膠，用3mol/L硫氰酸鉀（或鈉）洗滌，洗脫掉雜抗體，可再繼續(xù)使用。

有時雜抗原較少，其他蛋白也少，加入戊二醛后不形成膠凍狀，此時可加入無關(guān)蛋白進行交聯(lián)，如牛血清蛋白、兔血清、馬血清、卵白蛋白等。加入量以達到含總蛋白的2%～3%為宜。

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