ELISA方法被廣泛應用于各種抗原和抗體測定。但ELISA測定中影響因素較多,而且其操作中有一定的技術要求。稍有疏漏,就會直接影響到實驗的結果。近日,上海恒遠的技術人員對ELISA實驗的問題做出總結,今天文章主要針對ELISA顯色淡的原因及解決方案做出分析。1.原因:試劑盒在運輸途中時間太長,溫度太高。 解決方案:盡量縮短運輸時間,夏季應放冰塊降溫。2.原因:試劑盒未充分平衡。 解決方案:試劑盒從2~8℃冰箱取出后打開盒蓋,于室溫平衡至少20分鐘,確保所有試劑已平衡至室溫(約25℃)。3.原因:培養(yǎng)箱溫度不足37℃。 解決方案:注意培養(yǎng)箱溫度,放入反應板后盡量減少開啟次數以免影響溫度恒定,非隔水式培養(yǎng)箱尤其應注意。4.原因:保溫時間不足。 解決方案:校正定時鐘準確定時。5.原因:洗滌時沖擊力太大、浸泡時間過長、洗滌次數增加。 解決方案:按說明書要求保留洗滌時間,準確記住洗滌次數。6.原因:移液器吸液量不足,吸嘴內壁掛水太多或內壁不清潔。 解決方案:校正移液器,吸嘴要配套,裝吸嘴時要緊密,吸嘴內壁要清潔,一次性使用。7.原因:蒸餾水水質有問題。 解決方案:使用新鮮合格的蒸餾。8.原因:底物作用時間不足。 解決方案:準確定時。 顯色一定要控制時間,根據試劑盒說明操作即可。一般來說,顯色時間過短,結果偏低;顯色時間過長,空白增高或者非特異性顯色增加。
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上海恒遠生物科技有限公司是一家生物技術企業(yè),主要從事免疫學、分子生物學和常規(guī)生化試劑的研發(fā)、銷售,本公司可為您提供科研elisa試劑盒,種屬標本齊全,有專門針對人血清、血漿、全血、分泌物、尿液、細胞培養(yǎng)上清液、組織勻漿、組織液等標本的試劑盒;另有針對各種動物(鼠、兔、牛、馬、雞、豬、狗、山羊、猴、魚)的科研試劑。原創(chuàng)作者:上海恒遠生物科技有限公司