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ELISA試劑盒實(shí)驗(yàn)血清為何要稀釋以及步驟

點(diǎn)擊次數(shù):13376   發(fā)布時(shí)間:2019/7/31 9:01:32

 每一盒elisa試劑盒里邊都有一份對應(yīng)的闡明書,而每一份闡明書里都會有寫樣本和稀釋液的稀釋份額,為何樣本都需求稀釋呢?今天的文章中,上海恒遠(yuǎn)生物科技有限公司將為您剖析:為何ELISA試驗(yàn)血清樣本都需求稀釋?
 
 
    在ELISA試劑盒試驗(yàn)血清為何要稀釋?有兩個(gè)原因:
 
 
    1.競賽按捺對比顯著,應(yīng)稀釋競賽物;
 
 
    2.以下降非特異性反響,使特異性的抗原抗體反響充分體現(xiàn)出來。
血清稀釋用通常的PBS即可,可加1%的BSA,能有用下降ELISA本底,當(dāng)然假如你嫌費(fèi)事我覺得用生理鹽水代替PBS也不大。不論你是用直接競賽還是直接競賽,血清的稀釋倍數(shù)必定要事前確定,但也不必一點(diǎn)點(diǎn),你做一個(gè)預(yù)試驗(yàn)即可,挑選OD在1.0左右的稀釋倍數(shù),即你的ELISA中陰性孔OD在1.0,這么作出來的曲線對比靈敏。
 
 
    ELISA試劑盒試驗(yàn)稀釋血清的步驟:
 
 
    1、先把蛋白稀釋一定的倍數(shù),比如說10倍、20倍稀釋(這樣可以大體確定一個(gè)參數(shù)),將抗原進(jìn)行一系列稀釋包被微量反應(yīng)板
 
 
    2、再用一定稀釋度的陽性參考血清和陰性參考血清進(jìn)行孵育后洗滌,再加酶結(jié)合物進(jìn)行反應(yīng),經(jīng)孵育洗滌后,加底物溶液顯色,終止反應(yīng)后分別測定O.D值,選擇O.D值≥1.0的那個(gè)抗原稀釋度為zui適包被濃度。一般總是要選擇那個(gè)O.D值稍大于1.0,而不選擇小于1.0的抗原濃度。陰性參考血清O.D值要求<0.1-0.2。也就是要求陽性參考血清和陰性參考血清的O.D值有明顯差別。
 
    上海恒遠(yuǎn)生物科技有限公司由資深專家?guī)ь^組建研發(fā)團(tuán)隊(duì),十幾年ELISA試劑盒開發(fā)經(jīng)驗(yàn),品質(zhì)保障,值得信賴;BIM品牌試劑盒更是知名度高,已被國內(nèi)重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室廣泛使用,如北京生命科學(xué)研究所,中國科學(xué)院,協(xié)和醫(yī)科大學(xué)等;諸多權(quán)威刊物的文章廣泛引用,如Nature, PNAS, Cell Research, Biomaterials等,目前SCI文章及國內(nèi)核心期刊引用已達(dá)數(shù)百篇。專業(yè)技術(shù)團(tuán)隊(duì)提供完備的售前及售后服務(wù),確保您實(shí)驗(yàn)成功!

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