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細胞培養(yǎng)無菌操作基本技術(shù)

點擊次數(shù):12741   發(fā)布時間:2019/9/23 9:16:10

     1.實驗前,無菌室及無菌操作臺用紫外燈照射30-60分鐘滅菌,用70%酒精擦拭無菌操作臺面,并開啟無菌操作臺風(fēng)機運轉(zhuǎn)10分鐘后,才可開始實驗操作,每次操作只處理一株細胞,以免造成細胞交叉污染,實驗結(jié)束后,將實驗物品帶出工作臺,如需要繼續(xù)進行下一個實驗,則用70%酒精擦拭無菌操作臺面,再讓無菌操作臺風(fēng)機運轉(zhuǎn)10分鐘后,才可進行下一個實驗操作 
 
    2.無菌操作工作區(qū)域應(yīng)保持清潔與寬敞,必要物品,如試管架,移液器或吸管頭等可以暫時放置,其它實驗用品用完后應(yīng)及時移出,以利氣體流通,實驗用品要用70%酒精擦拭后才能帶入無菌操作臺內(nèi),實驗操作應(yīng)在操作臺中央無菌區(qū)域內(nèi)進行,勿在邊緣非無菌區(qū)域操作 
 
    3.小心取出無菌實驗用品,避免造成污染,切勿碰觸吸管與吸頭頭部或容器瓶口,不要在打開的容器正上方操作實驗,容器打開后,用手夾住瓶蓋并握住瓶身,傾斜約45°角取用,盡量勿將瓶蓋蓋口朝上放在臺面上
 
    4.工作人員應(yīng)注意自身的安全,必須穿戴實驗衣與手套后才進行實驗,對于來自人源性或病毒感染的細胞株應(yīng)特別小心,并選擇適當?shù)燃壍臒o菌操作臺(至少兩級),操作過程中,應(yīng)避免引起氣溶膠的產(chǎn)生,小心有毒性試劑,例如DMSO及TPA等,并避免尖銳物品傷人等
 
    5.定期檢查下列項目,CO2鋼瓶內(nèi)的CO2壓力,CO2培養(yǎng)箱內(nèi)的CO2濃度,溫度,及水盤是否有污染,無菌操作臺內(nèi)氣流壓力是否正常,定期更換紫外燈管及HEPA過濾器濾膜,預(yù)濾網(wǎng)(300小時/預(yù)濾網(wǎng),3000小時/HEPA)
 

原創(chuàng)作者:上海恒遠生物科技有限公司

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