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點(diǎn)擊次數(shù):13246 發(fā)布時(shí)間:2019/12/30 9:36:18
血清封閉就是將養(yǎng)殖的非免疫的正常動(dòng)物采血,然后不加抗凝劑,血液凝固,血快收縮,析出的淡黃色液體。經(jīng)過(guò)特殊工藝處理后的血清,特別適在各類免疫學(xué)實(shí)驗(yàn)中用于封閉處理, 比如:IHC、IF/ICC、ELISA等。血清封閉劑主要由小牛血清、PBS配制。
封閉步驟可減少一抗和二抗與非靶標(biāo)位點(diǎn)進(jìn)行非特異性結(jié)合時(shí)所產(chǎn)生的本底信號(hào)。理想情況是,封閉劑將占據(jù)樣本中的“黏性”位點(diǎn),比如暴露的帶電性或疏水性蛋白表面,同時(shí)不會(huì)干擾一抗/二抗識(shí)別靶表位,從而盡可能提高信噪比(S/N)。
封閉血清適用于免疫組化或者免疫熒光實(shí)驗(yàn)中樣本的封閉?梢苑忾]待檢樣本中與蛋白質(zhì)非特異性結(jié)合的位點(diǎn),另外還可以封閉樣品中內(nèi)源性的Fc片段結(jié)合位點(diǎn),阻斷抗體與樣品中的Fc受體結(jié)合,從而降低背景,減少假陽(yáng)性。對(duì)于適用多抗的實(shí)驗(yàn),二抗種屬來(lái)源的正常血清是封閉處理的金標(biāo)準(zhǔn)。
生物試劑的使用常識(shí):
(1)試劑切忌與手接觸(有些試劑有強(qiáng)腐蝕性、等特性)。
(2)要用潔凈的藥勺,量筒或滴管取用試劑,不允許用同一種工具同時(shí)連續(xù)取用多種試劑。取完一種試劑后,應(yīng)將工具洗凈(藥勺要擦干)后,才可取用另一種試劑。
(3)試劑取用后一定要將瓶塞蓋緊,不可放錯(cuò)瓶蓋和滴管,絕不允許張冠李戴,用完后請(qǐng)及時(shí)將瓶放回原處,以免遺忘,帶來(lái)不便。
(4)已取出的試劑不能再放回原試劑瓶?jī)?nèi)(怕產(chǎn)生原試劑的再次污染)。
原創(chuàng)作者:上海恒遠(yuǎn)生物科技有限公司
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