溶液是由一種或幾種物質(zhì)分散到另一種物質(zhì)里,組成的均一、穩(wěn)定的混合物,被分散的物質(zhì)(溶質(zhì))以分子或更小的質(zhì)點(diǎn)分散于另一物質(zhì)(溶劑)中。物質(zhì)在常溫時(shí)有固體、液體和氣體三種狀態(tài)。因此溶液也有三種狀態(tài),大氣本身就是一種氣體溶液,固體溶液混合物常稱固溶體,如合金。一般溶液只是專指液體溶液。液體溶液包括兩種,即能夠?qū)щ姷碾娊赓|(zhì)溶液和不能導(dǎo)電的非電解質(zhì)溶液。所謂膠體溶液,更確切的說應(yīng)稱為溶膠。其中,溶質(zhì)相當(dāng)于分散質(zhì),溶劑相當(dāng)于分散劑。在生活中常見的溶液有蔗糖溶液、碘酒、澄清石灰水、稀鹽酸、鹽水、空氣等。
今天給大家分享的是實(shí)驗(yàn)室里面常見溶液配制,有需要的伙伴可以收藏起來(lái)!
一、PBS:
取 PBS溶于1000ml的蒸餾水中,混勻,測(cè)pH值應(yīng)在7.2-7.4之間,若偏離此范圍,請(qǐng)用0.1N的HCL或NaOH調(diào)整。
二、TBS:
2.1 Tris緩沖液配方:(0.5 M pH7.6),Tris(三羥甲基氨基甲烷)60.57g,1N HCL 約420ml,雙蒸水 加至1000ml。
Tris緩沖液配制方法:
先以少量雙蒸水(300-500ml)溶解Tris,加入HCl后,用HCl(1N)或NaOH(1N)將pH調(diào)至7.6, *后雙蒸水加至1000ml。此液為儲(chǔ)備液,4℃冰箱中保存。
2.2 TBS配方:
Tris-HCI緩沖液(0.5M pH7.6) 100ml,NaCI 8.5-9g (0.15mol/L),雙蒸水 加至1000ml
TBS配制方法:
先以少量雙蒸水溶解NaCl,再加入Tris-HCl緩沖液,*后加雙蒸水至1000ml,充分搖勻。
三、枸櫞酸鹽緩沖液(Citrate buffer):
3.1 儲(chǔ)存液:
A. 0.1M枸櫞酸溶液:稱取21.01g枸櫞酸(C6H8O7·H20)溶于1000ml蒸餾水中。
B. 0.1M枸櫞酸鈉溶液:稱取29.41g枸櫞酸鈉(C6H5Na3O7·2H20)溶于1000ml蒸餾水中。
3.2 工作液:
取9ml A液和41ml B液加入450ml蒸餾水中,溶液pH值應(yīng)為6.0±0.1
四、胰酶(Trypsin):
4.1 胰蛋白酶消化液:
常用濃度為0.125%,即使用前將一滴試劑1胰酶溶液和三滴試劑2胰酶稀釋液均勻混合(1:3稀釋),則可直接滴加使用。胰酶的*終濃度可以根據(jù)使用者的要求進(jìn)行調(diào)整,濃度范圍可以從0.05%(1:10稀釋)至0.25%(1:1稀釋)。
4.2 胰蛋白酶:
取0.05g或0.1g胰蛋白酶加入到100ml 0.05%或0.1% pH7.8的無(wú)水氯化鈣水溶液中,溶解即可。
五、胃酶(Pepsin):
4%胃蛋白酶,用0.1mol/L HCL配制。(我公司備有胃蛋白酶消化工作液,不需稀釋直接滴加使用,歡迎選購(gòu))
六、DAB:
6.1 DAB Kit:
使用前只需將試劑盒提供的A、B、C三種試劑各一滴加至1ml雙蒸水中,即可獲得1ml DAB工作液,簡(jiǎn)單易用。
6.1 DAB:
6mgDAB溶于10mlTBS(0.05M pH7.6),再加入0.1ml濃度為3%的H2O2,過濾掉沉淀物,即可。
七、AEC:
4mg AEC溶于1ml二甲基甲酰胺中,加入14ml濃度為0.1M的醋酸緩沖液(pH5.2),然后加入0.15ml 3%H2O2,過濾掉沉淀物。
八、RIPA:
1×PBS,1%NP 40,0.5 sodium deoxycholate,0.1% SDS(此液體可長(zhǎng)期保存)。以下抑制劑以儲(chǔ)存液方式保存,臨用前加入RIPA中。
8.1 10mg/ml PMSF異丙醇溶液(用量為10ml/ml)
8.2 Aprotinin(Sigma產(chǎn)品,用量為30ml/ml)
8.3 1000mM sodium orthovanadate冷凍液(用量為10ml/ml)
九、Blotto A:
常規(guī)使用1×PBS,5% milk,0.05% Tween 20。
十、Blotto B:
與Phosphotyrosine抗體共用,1×PBS,1% milk,0.05% Tween 20。部分實(shí)驗(yàn)中milk可完全去除,但可能引起背景增高。
更多精彩內(nèi)容,可關(guān)注“恒遠(yuǎn)生物”公眾號(hào),獲取更多公司福利及科研資訊!
原創(chuàng)作者:上海恒遠(yuǎn)生物科技有限公司