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恒遠(yuǎn)酶聯(lián)免疫分析:細(xì)胞凋亡過程、特征及檢測手段

點(diǎn)擊次數(shù):13087   發(fā)布時(shí)間:2020/7/23 10:11:22

一、壞死與凋亡
長期以來細(xì)胞壞死被認(rèn)為是因病理而產(chǎn)生的被動(dòng)死亡,如物理性或化學(xué)性的損害因子及缺氧與營養(yǎng)不良等均導(dǎo)致細(xì)胞壞死,并常引起炎癥反應(yīng),是非正常死亡。

二、細(xì)胞凋亡
指的是程序性細(xì)胞死亡。相對(duì)于細(xì)胞壞死(necrosis),細(xì)胞凋亡是細(xì)胞主動(dòng)實(shí)施的。細(xì)胞凋亡一般由生理或病理性因素引起而細(xì)胞壞死則主要為缺氧造成, 兩者可以很容易通過觀察區(qū)分開來。在細(xì)胞凋亡過程中,細(xì)胞縮小,DNA被核酸內(nèi)切酶降解成180bp-200bp片段屬于有層次之?dāng)嗔眩?可以通過凝膠電泳證明),而細(xì)胞壞死時(shí),細(xì)胞腫脹,細(xì)胞膜被破壞,通透性改變。細(xì)胞器散落到細(xì)胞間質(zhì),需要巨噬細(xì)胞去清除,結(jié)果是該局部組織發(fā)炎。相比起細(xì)胞壞死,細(xì)胞凋亡是更常見的細(xì)胞死亡形式。
凋亡發(fā)生在許多生理學(xué)過程中,包括免疫系統(tǒng)的成熟和效應(yīng)機(jī)理,組織、器官和四肢的胚胎發(fā)育過程,神經(jīng)系統(tǒng)發(fā)育,激素依賴性組織重塑等。凋亡的不當(dāng)調(diào)控可能在眾多病理學(xué)情況中扮演著重要的角色,如貧血,中風(fēng),心臟病,癌癥,AIDS,自身免疫疾病,肝中毒以及中樞中央神經(jīng)系統(tǒng)退行性疾病等。 
在腫瘤學(xué)中,對(duì)于細(xì)胞凋亡行為的廣泛關(guān)注在于觀察各種抗癌藥物、輻射以及高熱觸發(fā)的細(xì)胞凋亡過程,以及腫瘤細(xì)胞對(duì)凋亡作出的響應(yīng)究竟受到了哪幾種腫瘤相關(guān)基因的調(diào)控,這些可能對(duì)癌癥治療具有很大的意義。

三、細(xì)胞凋亡特征

1.細(xì)胞膜外翻,磷脂酰絲氨酸暴露
磷脂酰絲氨酸從細(xì)胞膜內(nèi)側(cè)轉(zhuǎn)移到外側(cè)在細(xì)胞受到凋亡誘導(dǎo)后不久發(fā)生,可能作為免疫系統(tǒng)的識(shí)別標(biāo)志。

2.Caspase級(jí)聯(lián)反應(yīng)凋亡信號(hào)刺激使細(xì)胞色素C從線粒體釋放至細(xì)胞液,結(jié)合Apaf-1 (apoptoticprotease activating factor-1)后啟動(dòng)caspase(半胱氨酸蛋白酶家族)級(jí)聯(lián)反應(yīng):細(xì)胞色素C/Apaf-1復(fù)合物激活caspase-9,后者再激活caspase-3和其它下游caspase。

3.DNA片段化
細(xì)胞凋亡晚期中,核酸內(nèi)切酶(某些Caspase的底物)在核小體之間剪切核DNA,產(chǎn)生大量長度在180-200 bp 的DNA片段。

檢測凋亡產(chǎn)品分類
那么,針對(duì)細(xì)胞凋亡不同時(shí)期的檢測產(chǎn)品都有哪些呢?


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