ELISA是酶聯(lián)接免疫吸附劑測(cè)定( Enzyme-Linked Immunosorbnent Assay )的簡(jiǎn)稱(chēng)。它是繼免疫熒光和放射免疫技術(shù)之后發(fā)展起來(lái)的一種免疫酶技術(shù)。對(duì)于ELISA樣本的處理有很多小伙伴還不是很清楚,恒遠(yuǎn)生物為大家總結(jié)如下,希望對(duì)您的實(shí)驗(yàn)有所幫助。
ELISA的檢測(cè)目的是為了實(shí)驗(yàn)提供準(zhǔn)確的實(shí)驗(yàn)依據(jù),為了實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)的可靠性,在實(shí)驗(yàn)過(guò)程中必須堅(jiān)持質(zhì)量控制和全過(guò)程質(zhì)量控制,在收集標(biāo)本都必須有一個(gè)完整的計(jì)劃。
注意事項(xiàng)
1、每個(gè)樣本量收集體積=100ulx檢測(cè)種類(lèi),如果要做復(fù)孔,標(biāo)本量收集體積=100ulx檢測(cè)種類(lèi)x2。
2、樣本收集后若在一周內(nèi)進(jìn)行檢測(cè)可保存于2-8°C,若不及時(shí)檢測(cè),請(qǐng)進(jìn)行分裝,凍存于-20°或-80°C,避免反復(fù)凍融。
3、試劑盒的檢測(cè)范圍不等同于樣本中待測(cè)物的濃度范圍,建議實(shí)驗(yàn)通過(guò)相關(guān)文獻(xiàn)預(yù)估樣本中待測(cè)物的濃度并通過(guò)預(yù)實(shí)驗(yàn)確定樣本。
4、血清標(biāo)本采集是應(yīng)注意避免溶血,紅細(xì)胞溶解是會(huì)釋放出具有過(guò)氧化物酶活性的物質(zhì),溶血標(biāo)本可能會(huì)增加非特異性顯色。
5、為了確保尿液檢測(cè)的準(zhǔn)確性,必須正確收集尿液標(biāo)本和保存,收集尿液的容器必須要清潔干燥,使用一次性的容器,避免因用藥并清潔不到而造成的污染,尿液樣本必須新鮮,留取后,應(yīng)及時(shí)檢測(cè)或保存。
6、標(biāo)本宜在新鮮是檢測(cè)如有細(xì)菌污染,菌體中可能含有內(nèi)源性HRP,也會(huì)產(chǎn)生假陽(yáng)性反應(yīng)。如在冰箱中保存過(guò)久,其中可能發(fā)生聚合,間接法ELISA中樂(lè)視本底加深。
7、反復(fù)凍融會(huì)使蛋白效價(jià)降低,所以待測(cè)樣本如需多次檢測(cè),宜少量分裝凍存。
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