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恒遠發(fā)布抗磷脂抗體檢測方法

閱讀次數(shù)：1310 發(fā)布時間：2013/7/11 9:58:25

恒遠發(fā)布抗磷脂抗體檢測方法
    檢測APLA*敏感試驗是1983年介紹的ACLA的檢測，后來這種方法得到不斷改進，血清、血漿均可用于分析。該方法即為酶聯(lián)免疫吸附實驗（ELISA）：用純心磷脂的無水乙醇溶液（50／11）包被聚苯乙烯反應板，4~C過夜；常規(guī)方法洗滌后，用10％的BSA封閉；加l：50稀釋的待測血清，37~C孵育30rain；洗板后，再分別加入HRP標記的抗人γ（1：1 500）、抗α（1：1 000）、抗μ（1；8 000）鏈的F（ab）2片段，37℃30min然后，OPD顯色，加終止液。492nm波長測吸光度值。結(jié)果以正常對照組平均值±2S為正常上下限。

    這種以心磷脂作為靶抗原的ELISA方法，由于交叉反應，ACLA可能會與其他磷脂結(jié)合。

    操作中應注意以下事項：避免脫補體作用（加熱血清至56℃），否則會引起假陽性結(jié)果；反復凍融樣本也會導致ACLA結(jié)合力下降；微孔板也很重要。并且，在包被心磷脂同一板上，還可通過比較加和不加β2-GPI兩微孔問的結(jié)合活性，區(qū)別β2-GPI依賴與不依賴的ACLA。

    流式細胞術(shù)亦被應用于ACLA的檢測，可同時檢測APLA同種型。

抗磷脂抗體包括狼瘡抗凝物質(zhì)和抗心磷脂抗體。它可作為抗磷脂綜合癥中的重要自身抗體，其中抗心磷脂抗體（ACA）*為常見�？煞譃镮gG、IgA、IgM三類。

臨床意義：

1．抗心磷脂抗體陽性提示動、靜脈血栓形成，腦血管意外發(fā)生率高達56%。

2．抗心磷脂抗體與SLE密切相關(guān)。雙型或三型陽性SLE病人均會出現(xiàn)血栓、血小板減少性紫癜、繼發(fā)性貧血等癥狀。

3．抗心磷脂抗體陽性的女性患者易發(fā)生習慣性流產(chǎn)。

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